Dithiothreitol (DTT) یو عام استعمال کمولو ایجنټ دی، چې د نوي شنه اضافې په نوم هم پیژندل کیږي.دا یو کوچنی مالیکولر عضوي مرکب دی چې دوه مرکاپتان ګروپونه (-SH) لري.د دې د کمولو ملکیتونو او ثبات له امله، DTT په پراخه کچه د بایو کیمیا او مالیکول بیولوژي تجربو کې کارول کیږي.
د DTT اصلي رول په پروټینونو او نورو بایو مالیکولونو کې د ډیسلفایډ بانډونو کمول دي.د ډیسلفایډ بانډ د پروټین فولډ کولو او ثبات یوه مهمه برخه ده، مګر د ځینو تجربوي شرایطو لاندې، لکه د کمولو وړ SDS-PAGE تحلیل، د پروټین بیا یوځای کول او فولډ کول، دا اړینه ده چې د ډیسلفایډ بانډ دوه thiol ګروپونو ته راټیټ کړي ترڅو د ځایی جوړښت افشا کړي. پروټینDTT کولی شي د ډیسلفایډ بانډونو سره عکس العمل وکړي ترڅو دوی مرکاپتان ګروپونو ته راټیټ کړي ، پدې توګه د پروټین ځایي جوړښت خلاصوي او تحلیل او مینځل اسانه کوي.
DTT د انزایم فعالیت او ثبات ساتلو لپاره هم کارول کیدی شي.په ځینو انزایمونو کې کتلیز شوي تعاملاتو کې، د انزایم فعالیت ممکن د اکسیډینټ لخوا کم شي.DTT کولی شي د اکسیډینټ سره عکس العمل وکړي ترڅو دوی بې ضرر موادو ته راکم کړي ، پدې توګه د انزایم فعالیت او ثبات ساتي.
د دودیز کمولو اجنټانو لکه β-mercaptoethanol (β-ME) په پرتله، DTT یو خوندي او ډیر باثباته کمونکي اجنټ ګڼل کیږي.دا نه یوازې په آبي محلول کې باثباته دی ، بلکه د لوړې تودوخې او اسید اساس شرایطو لاندې خپل کمولو ملکیتونه ساتي.
د DTT کارول نسبتا ساده دي.په عموم کې، DTT په مناسب بفر کې منحل کیږي او بیا په تجربوي سیسټم کې اضافه کیږي.د DTT مطلوب غلظت باید د ځانګړي تجربې له مخې وټاکل شي، او عموما د 0.1-1mM په حد کې کارول کیږي.ټیټ غلظت کولی شي د حجرو په وده منفي اغیزې کم کړي او کولی شي د هدف پروټینونو د ډیر فشار له امله سایټوټوکسیکیت کم کړي.لوړ غلظت کولی شي د حجرو میټابولیک بار ډیر کړي، د حجرو وده او د بیان موثریت اغیزه کوي.
د مطلوب غلظت ټاکلو لاره په مختلف غلظت کې د IPTG انډکشن ازموینې ترسره کولو سره د هدف پروټین د بیان کچه ارزول کیدی شي.د کوچني کچې کلتور ازموینې د IPTG غلظت لړۍ (د مثال په توګه 0.1 mM, 0.5 mM, 1 mM او داسې نور) په کارولو سره ترسره کیدی شي او په مختلف غلظت کې د بیان اغیز د هدف پروټین د بیان کچې په موندلو سره ارزول کیدی شي (د مثال په توګه لویدیځ د داغ یا فلوروسینس کشف).د تجربوي پایلو له مخې، د غوره بیان اغیزې سره غلظت د غوره غلظت په توګه وټاکل شو.
سربیره پردې ، تاسو کولی شئ اړونده ادبیاتو یا نورو لابراتوارونو تجربې ته هم مراجعه وکړئ ترڅو د ورته تجربوي شرایطو لاندې د عام کارول شوي IPTG غلظت حد باندې پوه شئ ، او بیا د تجربوي اړتیاو سره سم اصلاح او تنظیم کړئ.
دا مهمه ده چې په یاد ولرئ چې مطلوب غلظت ممکن د مختلف بیان سیسټمونو ، هدف پروټینونو او تجربوي شرایطو پورې اړه ولري ، نو دا غوره ده چې د قضیې په اساس اصلاح وکړئ.
په لنډیز کې، DTT یو عام استعمال کمولو اجنټ دی چې په پروټینونو او نورو بایومولکولونو کې د ډیسلفایډ بانډونو کمولو او د انزایم فعالیت او ثبات ساتلو لپاره کارول کیدی شي.دا په پراخه کچه د بایو کیمیا او مالیکول بیولوژی تجربو کې کارول شوی.
د پوسټ وخت: سپتمبر-28-2023