د مطلوب غلظت څنګه معلوم کړو؟
د انډیوسر IPTG (آیسوپروپیل-بیټا-ډي-تیوګالیکټوسایډ) لپاره، غلظت څومره لوړ وي، هومره ښه وي. غوره غلظت په ځانګړو تجربوي شرایطو او مطلوب انډکشن اغیز پورې اړه لري.
عموما، د IPTG غلظت د 0.1-1 mM په حد کې کارول کیږي. ټیټ غلظت کولی شي د حجرو په وده باندې منفي اغیزې کمې کړي او د هدف پروټینونو د ډیر څرګندیدو له امله سایټوټوکسیکیت کم کړي. لوړ غلظت ممکن د حجرو ډیر میټابولیک بار رامینځته کړي، چې د حجرو وده او د څرګندیدو موثریت اغیزمن کوي.
د مطلوب غلظت د ټاکلو لاره دا کیدی شي چې د هدف پروټین د څرګندولو کچه په مختلفو غلظتونو کې د IPTG انډکشن ازموینو په ترسره کولو سره ارزونه وشي. د کوچني پیمانه کلتور ازموینې د IPTG غلظتونو (د مثال په توګه 0.1 mM، 0.5 mM، 1 mM، او نور) په کارولو سره ترسره کیدی شي او په مختلفو غلظتونو کې د څرګندولو اغیزه د هدف پروټین د څرګندولو کچې کشف کولو سره ارزول کیدی شي (د مثال په توګه ویسټرن بلاټ یا فلوروسینس کشف). د تجربوي پایلو له مخې، د غوره څرګندولو اغیز سره غلظت د غوره غلظت په توګه غوره شو.
برسېره پردې، تاسو کولی شئ اړونده ادبیاتو یا د نورو لابراتوارونو تجربې ته هم مراجعه وکړئ ترڅو د ورته تجربوي شرایطو لاندې د IPTG غلظت حد په عام ډول کارول کیږي، او بیا د تجربوي اړتیاو سره سم اصلاح او تنظیم کړئ.
دا مهمه ده چې په یاد ولرئ چې غوره غلظت ممکن د مختلف اظهار سیسټمونو، هدف پروټینونو، او تجربوي شرایطو پورې اړه ولري، نو دا غوره ده چې د قضیې په اساس اصلاح شي.
د پوسټ وخت: سپتمبر-۲۸-۲۰۲۳